La PCR digital (digital polymerase chain reaction) es una técnica de cuantificación de ácidos nucleicos que está desplazando a la PCR a tiempo real por las numerosas ventajas que ofrece en los ámbitos de la investigación y el diagnóstico.

También se presenta beneficiosa en la industria, concretamente en aplicaciones como el análisis a gran escala de expresión génica, detección de mutaciones de baja frecuencia, análisis de biopsia líquida, detección múltiple de secuencias (multiplexing), análisis de variación en el número de copias (CNV), detección de carga vírica y  monitorización de respuesta a tratamientos.   

En este curso teórico-práctico aprenderás los principios teóricos y técnicos de la PCR digital, aplicaciones comunes con ejemplos concretos, formación práctica de todo el proceso experimental desde la generación de gotas hasta el análisis de los datos. También profundizarás en el diseño de experimentos y sondas. Finalmente, podrás resolver todas tus dudas con expertos técnicos y usuarios con amplia experiencia. 

• Biólogos/as.
• Biotecnólogos/as.
• Investigadores/as en el sector público y privado.
• Personal técnico de laboratorio en el sector público y privado.
• Profesionales de la salud.

• Aprender la técnica de cuantificación de ácidos nucleicos a través de la PCR digital.

PROGRAMA PRELIMINAR

1. Sesión práctica I: uso de la ddPCR para análisis de expresión de genes.
2. Introducción a la ddPCR.
3. Aplicaciones I:
• Detección de ADN mitocondrial circulante como biomarcador de enfermedades neurológicas.
• Optimización de la biopsia líquida para el diagnóstico de tumores sólidos pediátricos.
4. Sesión práctica II:
• Programación del lector de gotas.
• Programación del reader.
5. Sesión práctica III: software, análisis e interpretación de datos, resolución dudas.
6. Bases matemáticas de la cuantificación de ácidos nucleicos por ddPCR. 
7. Aplicaciones II. Approaches to quantify exón skipping.
8. Caracterización del reservorio viral en personas con VIH y evaluación de nuevas estrategias de curación.
9. Detección de mutaciones puntuales y de edición genética mediante ddPCR.
10. Sesión práctica IV: diseño de sondas.

La formación práctica se realizará en los laboratorios de neurología de la Fundació per a la Recerca i Docència Sant Joan Déu Barcelona con el equipo de ddPCR de BioRad.

Los reactivos y material fungible necesarios para todas las etapas de la técnica estarán disponibles en el laboratorio.

Las sesiones teóricas se realizarán en las aulas del edificio docente utilizando material didactico (presentacionesy protocolos).