La PCR digital es una técnica de cuantificación de ácidos nucleicos que está desplazando a la PCR a tiempo real por las numerosas ventajas que ofrece en los ámbitos de la investigación, diagnóstico e industria en aplicaciones como el análisis a gran escala de expresión génica, detección de mutaciones de baja frecuencia, análisis de biopsia líquida, detección múltiple de secuencias (multiplexing), análisis de variación en el número de copias (CNV), detección de carga vírica y monitorización de respuesta a tratamientos.

Esto es debido a su mayor sensibilidad, precisión y reproducibilidad frente a la PCR a tiempo real, y porque al proporcionar una cuantificación absoluta no requiere de curvas ni secuencias de referencia, simplificando los experimentos y reduciendo los tiempos y costes. Por estos motivos es la técnica de preferencia de las agencias reguladoras como la FDA.

¿Quieres saber cómo la PCR digital puede ayudarte?

En este curso teórico-práctico aprenderás los principios teóricos y técnicos de la PCR digital, aplicaciones comunes con ejemplos concretos, formación práctica de todo el proceso experimental, desde la generación de gotas hasta el análisis de los datos. Te capacitarás en el diseño de experimentos y sondas, coste y resolución de dudas en manos de expertos técnicos y usuarios con amplia experiencia. 

• Biólogos/as.
• Biotecnólogos/as.
• Investigadores/as en el sector público y privado.
• Personal técnico de laboratorio en el sector público y privado.
• Profesionales de la salud.

• Aprender la técnica de cuantificación de ácidos nucleicos a través de la PCR digital.

• Sesión práctica I: uso de la ddPCR para análisis de expresión de genes.
• Introducción a la ddPCR.
• Aplicaciones I:
• Uso de ddPCR para analizar la eficiencia de la edición génica.
• Aplicación de la ddPCR para el diagnóstico de los tumores pediátricos.
• Sesión práctica II: programación del lector de gotas.
• Sesión práctica III: Software, análisis e interpretación de datos, resolución, dudas.
• Bases matemáticas de la cuantificación de ácidos nucleicos por ddPCR.
• Aplicaciones II:
• Deteccion de oligonucleotides antisentido en tejido: adaptación de la técnica de “Splint PCR” a la ddPCR.
• Application of ddPCR to the routine genetic diagnosis workflow.
• Nuevas aplicaciones de la ddPCR.
• Sesión práctica IV: diseño de sondas.

La formación práctica se realizará en los laboratorios de neurología de la Fundació per a la Recerca i Docència Sant Joan Déu Barcelona con el equipo de ddPCR de BioRad.

Los reactivos y material fungible necesarios para todas las etapas de la técnica estarán disponibles en el laboratorio.

Las sesiones teóricas se realizarán en las aulas del edificio docente utilizando material didactico (presentaciones y protocolos).